PCR實驗室的污染(ran)來源

1、樣(yang)本(ben)間交叉污染：

收集樣(yang)本的容器(qi)被污染或樣(yang)本密封不(bu)(bu)嚴外溢；不(bu)(bu)同(tong)樣(yang)本移液時忘記更換槍尖(jian)或未(wei)使(shi)用(yong)帶濾芯槍尖(jian)；移液器(qi)等實驗器(qi)具及耗材未(wei)及時消毒滅菌；不(bu)(bu)同(tong)樣(yang)本同(tong)時開(kai)蓋或樣(yang)本劇烈震蕩、反復(fu)吹吸(xi)導致氣溶(rong)膠形成擴(kuo)散，相互交叉污染。

2、實驗試(shi)劑污染：

主要(yao)是在 PCR 組分試(shi)(shi)劑(ji)加(jia)樣(yang)過(guo)(guo)程中(zhong)，由于移液(ye)器、容器、陰(yin)性對(dui)照(zhao)及其它試(shi)(shi)劑(ji)被核酸模板(ban)或陽(yang)性對(dui)照(zhao)污(wu)(wu)染(ran)。 加(jia)樣(yang)過(guo)(guo)程中(zhong)，因為(wei) PCR 試(shi)(shi)劑(ji)對(dui)溫度(du)十分敏感(gan)，需要(yao)通過(guo)(guo)冰浴使得 PCR 試(shi)(shi)劑(ji)和 PCR 板(ban)/管處于 0℃，但這個(ge)過(guo)(guo)程也是充滿了污(wu)(wu)染(ran)的風險的。

3、擴增產物污染(ran)：

大量拷(kao)貝的(de)產物泄漏或(huo)擴(kuo)增后的(de)PCR反應管意外(wai)開蓋，這是 PCR 反應中主要常見的(de)污(wu)染(ran)問(wen)題。因為(wei) PCR 產物拷(kao)貝量大，遠遠高于 PCR 檢測數個(ge)拷(kao)貝的(de)極(ji)限(xian)，所(suo)以極(ji)微(wei)量的(de) PCR 產物污(wu)染(ran)，就(jiu)可(ke)形成(cheng)假陽性。

4、克隆質粒污(wu)染：

作為陽性質控品的(de)克隆質粒外溢。

PCR實驗室的污染(ran)應急(ji)處理(li)方法

1、若(ruo)核酸樣本溢出：

立即用布或紙巾覆蓋，由外圍(wei)向中(zhong)心傾倒10%的次氯(lv)(lv)酸消毒劑，約30分鐘后，清除污染物品(pin)，再用次氯(lv)(lv)酸消毒劑擦拭，并(bing)用75%酒精(jing)噴灑，移動紫外車定點照射1小(xiao)時。

2、其他不明情(qing)況(kuang)污染：

1、暫停(ting)所有(you)(you)實驗操作(zuo)；2、清理(li)實驗室(shi)內所有(you)(you)物品，尋找污(wu)(wu)(wu)染(ran)來源(yuan)；3、加(jia)大實驗室(shi)的(de)(de)(de)(de)(de)通風(feng)；4、對實驗室(shi)內所有(you)(you)表(biao)面(mian)(mian)（臺面(mian)(mian)、地(di)面(mian)(mian)及墻面(mian)(mian)） 進(jin)行消(xiao)(xiao)毒(du)；5、75%酒精空(kong)中噴霧(wu)；6、開(kai)啟紫(zi)外消(xiao)(xiao)毒(du)裝置，延長紫(zi)外照射時(shi)間(jian)（4小時(shi)以上(shang)）；7、以上(shang)措(cuo)施每日進(jin)行，直至(zhi)污(wu)(wu)(wu)染(ran)消(xiao)(xiao)除(chu)；用(yong)新試劑及確認(ren)無污(wu)(wu)(wu)染(ran)的(de)(de)(de)(de)(de)器材(cai)進(jin)行原污(wu)(wu)(wu)染(ran)項目(mu)的(de)(de)(de)(de)(de)試劑空(kong)白(bai)檢(jian)測，連續3次均(jun)陰性后方(fang)可(ke)進(jin)行常規檢(jian)測。PCR污(wu)(wu)(wu)染(ran)的(de)(de)(de)(de)(de)范圍(wei)很(hen)廣(guang)，不同樓層也會(hui)(hui)產(chan)生影(ying)(ying)響(xiang)，甚至(zhi)會(hui)(hui)影(ying)(ying)響(xiang)相鄰(lin)建筑；PCR污(wu)(wu)(wu)染(ran)的(de)(de)(de)(de)(de)時(shi)間(jian)很(hen)長，幾(ji)個月甚至(zhi)半年(nian)；PCR污(wu)(wu)(wu)染(ran)的(de)(de)(de)(de)(de)影(ying)(ying)響(xiang)很(hen)深，影(ying)(ying)響(xiang)我們(men)(men)的(de)(de)(de)(de)(de)生產(chan)計劃，阻礙我們(men)(men)的(de)(de)(de)(de)(de)研發進(jin)度，直接造成公司人力、財力的(de)(de)(de)(de)(de)損失。但隨著新技術和一些問題的(de)(de)(de)(de)(de)明晰，無污(wu)(wu)(wu)染(ran)PCR檢(jian)測的(de)(de)(de)(de)(de)那一天(tian)離我們(men)(men)會(hui)(hui)越(yue)來越(yue)近！